食品大腸桿菌超標(biāo)是困擾食品行業(yè)生產(chǎn)加工的重要難題,大腸桿菌超標(biāo)可能會(huì)導(dǎo)致人食物中毒,危及食用者的自身安全,食品大腸桿菌超標(biāo)的幾種檢測方法都有什么?如何避免食品加工大腸桿菌超標(biāo)?
幾種大腸桿菌檢測方法:
1 、氣相色譜(GC)
氣相色譜法主要是將大腸桿菌經(jīng)過一系列衍生化的前處理后,為接下來的分析研究提供盡可能多的化學(xué)組分。大腸桿菌的污染程度可以用頂空氣相色譜法來分析,其原理是利用食品密封系統(tǒng)頂部的微生物代謝產(chǎn)物CO2對微生物進(jìn)行分析。這種方法對食品質(zhì)量安全檢測有重大意義。與傳統(tǒng)技術(shù)相比,此種方法具有檢測速度快、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。
2 、ATP生物發(fā)光技術(shù)
ATP生物發(fā)光技術(shù)是近些年來發(fā)展較快的微生物快速檢測方法。ATP是活細(xì)胞中*普遍的能量代謝產(chǎn)物,為細(xì)胞提供各種生理活動(dòng)所需的能量,而且其在生物體內(nèi)含量維持在一定的范圍內(nèi)。ATP含量檢測的一種方法是熒光光度法,生物發(fā)光是活細(xì)胞在熒光素酶催化下發(fā)出的熒光。目前使用的熒光素酶主要來源于北美的螢火蟲,相對分子質(zhì)量為62000的蛋白質(zhì),它可以催化熒光素的氧化反應(yīng),這種反應(yīng)的終產(chǎn)物不穩(wěn)定,很快分解產(chǎn)生熒光。與傳統(tǒng)檢測方法相比,不同之處在于幾分鐘內(nèi)便可獲得檢測結(jié)果,而且熒光光度計(jì)是便攜式的,使用非常方便,適用于現(xiàn)場檢測,這種技術(shù)可以用于檢測微小的污染物水平以及食品加工設(shè)備及其表面的清潔程度的檢測。
3 、**液相色譜法(HPLC)
**液相色譜法(HPLC)主要是根據(jù)離子配對反相層析的原理來分析核酸。HPLC主要是針對DNA片段分離。長鏈DNA所攜帶的磷酸基團(tuán)比較多,因此會(huì)有更多的TEAA與之相融合,其在柱內(nèi)停留的時(shí)間增加。因?yàn)橐译婢哂杏H水性,可以通過其而將DNA分離,在具備一定的變性溫度下,可以通過圖譜顯示明顯的吸收峰。該技術(shù)具有準(zhǔn)確度高、靈敏度高、成本低等優(yōu)點(diǎn),可大大提高工作效率。
4、PCR檢測技術(shù)
聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)即PCR(polymerase chain reaction),該技術(shù)是在1971年首先被Kleppe等提出,1985年才作為一種檢測方法獲得認(rèn)可。PCR檢測技術(shù)是一種聚合酶鏈反應(yīng),其采用變性―退火―延伸三個(gè)步驟使DNA基因能夠在體外實(shí)現(xiàn)解旋解鏈,類似于一種體外增加、復(fù)制形式。理論上可在2h內(nèi)將一個(gè)DNA分子擴(kuò)增到106~109倍,采用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光條帶。在食品微生物檢測領(lǐng)域,PCR可用于快速檢測食品中的微生物含量。但該方法需要較長的時(shí)間的樣品純化處理,且對操作人員的專業(yè)知識的要求也較高。
5、免疫磁珠技術(shù)(IMS)
免疫磁珠技術(shù)是一種大腸桿菌的分離技術(shù)。其原理是以磁珠為抗體載體,磁珠和大腸桿菌結(jié)合,通過磁力來實(shí)現(xiàn)力學(xué)移動(dòng)進(jìn)而將大腸桿菌進(jìn)行分離。與其他的細(xì)菌分離方法相比,免疫磁珠技術(shù)在很大程度上提高了樣本中病原性副溶血性弧菌的檢測效率。
6、生物傳感器檢測技術(shù)
生物傳感器主要是以生物化學(xué)傳感技術(shù)為基礎(chǔ),用抗體、酶、細(xì)胞等作為識別元件,并與信號轉(zhuǎn)換器和電子測量儀聯(lián)合構(gòu)成的一種分析工具。目前已經(jīng)成熟的商品化的傳感器有免疫傳感器、酶傳感器、DNA雜交傳感器、微生物傳感器、分子印跡傳感器等。生物傳感器具有諸多優(yōu)點(diǎn),如高靈敏度、高選擇性、較好的穩(wěn)定性、低成本、且能在復(fù)雜的體系中快速在線監(jiān)測。
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